Flow cytometry adalah teknik diagnostik dan penelitian yang dikenal selama bertahun-tahun dan banyak digunakan dalam onkologi. Flow cytometry memungkinkan sel-sel yang menyusun suspensi dalam aliran cairan laminar, atau bertingkat, diperiksa dengan alat yang disebut flow cytometer. Apa saja indikasi flow cytometry dan bagaimana cara melakukannya?
Flow cytometry digunakan dalam mendiagnosis neoplasma hematologi karena merupakan tumor cair, tetapi ini hanya metode tambahan. Namun, perlu diingat bahwa ada satu kanker yang hanya dapat didiagnosis dengan metode ini. Ini adalah leukemia limfositik kronis.
Untuk penyakit neoplastik lainnya, aliran sitometri digunakan sebagai alat bantu diagnostik karena menunjukkan ciri-ciri yang sangat penting dari sel neoplastik. Metode ini juga digunakan untuk menilai efektivitas pengobatan yang diterapkan.
Flow cytometry - apa yang ditunjukkannya?
Aliran cairan yang mengandung partikel uji dilewatkan dengan kecepatan konstan (100-2000 partikel per detik) melalui area pengukuran sitometer. Di sini, metode optik menganalisis bentuk, dimensi, struktur internal sel dan isinya, misalnya DNA. Semua sel diberi label secara optik.
Pengukuran didasarkan pada sifat hamburan sinar laser oleh sel individu atau komponennya (nuklei, kromosom, mitokondria) atau fluoresensi yang diinduksi olehnya.
Sinyal optik diubah menjadi sinyal listrik yang, setelah dianalisis, disajikan secara grafis sebagai distribusi mono- atau biparametrik.
Sitometer juga memungkinkan pemisahan partikel setelah keluar dari zona pengukuran. Dapat dikatakan bahwa aparatus mengatur (memisahkan) sel dengan elemen penyusun yang sama (jenis preparatif) atau mengekstrak jenis sel tertentu (jenis analitik).
Flow cytometry memungkinkan studi tentang karakteristik populasi sel, analisis komponen seluler (terutama seperti asam nukleat, protein, antigen permukaan dan sel), aktivitas enzimatik, potensial membran, aktivitas mitokondria, pH intraseluler, transpor ion, dan fluiditas membran.
Flow cytometry - aplikasi
Sitometri aliran yang digunakan dalam diagnostik memungkinkan untuk menentukan fenotipe sel neoplastik dan ekspresi protein individu. Untuk mencapai hal ini, antibodi fluoresen berlabel digunakan yang mengikat antigen pada permukaan membran sel secara khas. Berkat ini, dimungkinkan untuk menentukan tingkat diferensiasi, asal, penanda prognostik dan terapeutiknya, yang memfasilitasi keputusan tentang prosedur diagnostik dan terapeutik lebih lanjut.
Aplikasi lain untuk aliran sitometri memantau keefektifan pengobatan yang diterapkan dengan menilai apa yang disebut "penyakit sisa", yaitu persentase sel dengan fenotipe mirip tumor yang tersisa setelah pengobatan.
Flow cytometry juga memfasilitasi penelitian penyakit kanker. Berkat metode ini, dimungkinkan untuk mencari, misalnya, reseptor yang ada di permukaan sel neoplastik dan dapat menjadi target pengobatan.
Metode ini memungkinkan untuk mengevaluasi aktivitas protein di dalam sel. Dimungkinkan juga untuk menilai siklus sel, misalnya dengan menentukan jumlah DNA di dalam sel.
Dalam proses proliferasi, sel melewati siklus sel melalui fase-fase di mana jumlah DNA menjadi dua kali lipat. Dengan menilai jumlah ini, dimungkinkan untuk menunjukkan di fase apa sel berada, apakah mereka berkembang biak atau tidak, atau apakah mereka akan menuju apoptosis. Dengan kata lain, dengan bantuan flow cytometry Anda dapat mengetahui apakah sel-sel sedang mempersiapkan apoptosis, proses kematian terprogram.
Flow cytometry - masa depan
Flow cytometry telah dikenal dan digunakan dalam pengobatan selama beberapa dekade. Namun, ini terus ditingkatkan dan menciptakan kemungkinan diagnostik dan penelitian baru. Pada periode pertama menggunakan metode ini, hanya mungkin untuk menentukan ukuran dan derajat granularitas sel.
Penggunaan sinar laser dalam perangkat sitometri aliran memungkinkan Anda untuk merangsang penanda fluoresen tertentu dan kemudian mengevaluasi emisinya. Sitometer modern memungkinkan peningkatan yang signifikan dalam jumlah penanda yang dinilai pada satu waktu, yang secara pasti berarti peningkatan kepekaan metode ini.
Itulah mengapa digunakan tidak hanya dalam diagnosis penyakit neoplastik, tetapi juga untuk menilai keefektifan pengobatan.
Tentang Penulis
Baca lebih banyak artikel dari penulis ini
